يواجه متلقو زرع الأعضاء مخاطر كبيرة من العدوى الحادة أو المزمنة التي تهدد بقاء الطعم. فيروس BK (BKV) وفيروس JC (JCV) هما فيروسان انتهازيون بارزان، وقد يسببان اعتلال الكلية المرتبط بالفيروسات البوليوما وفقدان كلية الطعم لدى المرضى الذين في حالة كبت مناعي بعد زرع الكلى. لذا، فإن الكشف المبكر والمراقبة المستمرة لحمل الفيروس ضرورية للغاية. ومع ذلك، فإن الطرق التشخيصية الحالية لا تزال محدودة، وتطوير تقنية الكشف الجزيئي الجديدة أمر ملح للغاية. تم تحسين التسلسلات وتركيزات الحمض النووي الريبي للكرسبير (crRNA)، وتركيز Cas13a، والمبادئ الأولية لتكبير البوليميراز الملتصق (RPA) للكشف عن BKV وJCV. بعد ذلك، تم تصميم وتصنيع رقاقة ميكروفلويديك بدوارة مزدوجة، وتم دمجها مع CRISPR (ddCRISPR) للكشف النوعي المتزامن عن BKV وJCV. وبعد ذلك، تم التحقق من اختبار ddCRISPR باستخدام عينات سريرية. ثم تم تطوير شريط تدفق جانبي مدمج مع CRISPR (LFCRISPR) للكشف عن BKV وJCV في البيئات محدودة الموارد. تم إنشاء وتحسين نظام تفاعل RPA-CRISPR في وعاء واحد للكشف عن BKV وJCV. يمكن لـ ddCRISPR الكشف المتزامن والسريع عن BKV وJCV بحساسية عالية (10 نسخ/مل لـ BKV و1 نسخة/مل لـ JCV)، وتوفير كمية مطلقة مناسبة للكشف عن حمولة الفيروس، ومفيدة للعلاج الشخصي والدقيق لمتلقي زرع الأعضاء. تبسط LFCRISPR العملية التشغيلية من خلال قراءة بصرية بسيطة، مما يسهل فحص الفيروس بعد زرع العضو. تدمج هذه المنصات الفحوصات الجزيئية في نموذج علاج الزرع، مما يقلل التكاليف، ويطيل عمر الطعم، ويحسن نتائج إدارة ما بعد الجراحة في زرع الكلى، ويعزز جودة حياة المرضى.
Keywords
فيروس BK (BKV); فيروس JC (JCV); زرع الكلى; تكرارات متقطعة قصيرة متراصفة (CRISPR); ميكروفلويديك; اختبار التدفق الجانبي (LFA)